抗体发现
单B细胞抗体筛选是利用微流控技术分选单B细胞,再结合单细胞测序形成的一种单克隆抗体体外发现技术。具有高通量、高效率的特点,是近几年比较受欢迎的抗体开发技术。
图片来源于:[1]Laure-Hélène Ouisse, Gautreau-Rolland L , Marie-Claire Devilder…. Antigen-specific single B cell sorting and expression-cloning from immunoglobulin humanized rats: a rapid and versatile method for the generation of high affinity and discriminative human monoclonal antibodies[J]. BMC Biotechnology, 2017, 17(1):3.
服务优势 :
•充分保留 B 细胞抗体多样性,便于新型抗体的研发;
• 速度快,通量高,短时间内可筛选出上百株有亲和力的抗体;
• 利用 BLI 技术为客户提供可靠的亲和力数据;
• 提供抗体表达平台,可大规模制备符合要求的抗体进行相关研究。
服务信息:
服务项目 | 服务内容 | 交付内容 | 服务周期 |
单B细胞抗体筛选 | 抗原制备(可选) | 抗原检测报告 | —— |
小鼠免疫 | 小鼠免疫报告 | 3个月 | |
流式单细胞分选 | 抗体氨基酸序列; 抗体表达及检测报告,0.5mg-1mg抗体 |
1-2个月 | |
基因调取 | |||
通量表达 | |||
鉴定检测 | |||
抗体制备 |
获取蛋白信息最快速的方式是直接对原始蛋白进行分析,获取其中一级结构,快速实现对相关蛋白氨基酸序列 的精准解析。所以质谱法已成为抗体全序列测定的首选方法。在几乎所有用于抗体测序的质谱方案中,都会先 将抗体分解成 15-20 个氨基酸长的肽,然后在质谱仪中进行分析。
图片来源于:biomart.cn
服务优势 :
• 适用性广,对抗体种属和亚型没有要求 ;
• 样本可以是电泳胶、冻干、液体等形态 ;
• 蛋白和酶也可以测序 ;
• 速度快,能够确保获得抗体序列信息及完整的测序报告。
服务信息:
服务项目 | 服务内容 | 交付内容 | 服务周期 |
蛋白质从头测序服务 | 抗体序列测定 | 氨基酸序列报告 | 2周 |
基因合成 | 载体图谱,1-2ug质粒 | 1周 | |
抗体瞬转 | 0.5-1mg抗体 | 1周 |
为解决客户杂交瘤细胞基因丢失的困扰,自主研发设计了不同物种抗体序列的引物,利用这些引物进行 PCR扩增得到抗体重链、轻链可变区的序列并进行测序分析,然后将可变区序列构建至含有恒定区的载体上,得到全长抗体表达载体。
技术路线
服务优势
• 速度快,1-2 周能够确保获得杂交瘤细胞的抗体序列信息和完整的测序报告;
• 灵活性比较强,可根据客户要求更换不同种属的 IgG;
• 高准确性,进行多个亚克隆的测序,确保序列完全正确 ;
• 从杂交瘤细胞测序到抗体制备提供一站式服务。
服务信息:
服务项目 | 服务内容 | 交付内容 | 服务周期 |
杂交瘤细胞测序 | 杂交瘤细胞培养 | 2支冻存杂交瘤细胞,抗体可变区序列 | 2-3周 |
基因序列调取 | |||
亚克隆构建 | 抗体序列图谱、1-2ug质粒 | 1周 | |
抗体小试表达 | 0.5-1mg抗体 | 1周 |